Cellectis presenterà i primi dati che esplorano i nuovi processi di editing TALEN® nelle cellule staminali e progenitrici ematopoietiche (HSPC) all'American Society of Gene and Cell Therapy (ASGCT) che si terrà dal 7 all'11 maggio 2024. Presentazione del poster: L'editing intronico delle HSPC consente l'espressione specifica del lignaggio dei farmaci terapeutici: La terapia genica che utilizza cellule staminali ematopoietiche e progenitrici (HSPC) modificate ha il potenziale di fornire una fornitura a vita di farmaci geneticamente codificati. La maggior parte delle terapie ha un impatto sulla difficoltà di attraversare la barriera emato-encefalica (BBB).

La BBB è una membrana endoteliale continua che, insieme ai periciti e ad altri componenti dell'unità neurovascolare, limita l'ingresso di tossine, agenti patogeni, proteine e piccole molecole nel cervello. Cellectis ha sviluppato una tecnologia di editing di introni senza promotore mediata da TALEN® che consente l'espressione di un transgene terapeutico esclusivamente da monociti derivati da HSPC modificate. Le cellule modificate contenenti proteine terapeutiche geneticamente codificate hanno la capacità di attraversare la barriera emato-encefalica e di secernere la terapia corrispondente all'interno del cervello.

Questo nuovo approccio di editing è un'importante aggiunta alla cassetta degli attrezzi dell'editing genico delle HSPC, che potrebbe sbloccare nuove strategie per il trattamento delle malattie metaboliche e neurologiche. I dati della ricerca hanno dimostrato che: L'editing dell'introne può essere eseguito all'interno di geni endogeni specifici delle cellule B, T e Monociti (CD20, CD4 e CD11b, rispettivamente); l'editing dell'introne consente l'espressione di transgeni in modo specifico per il lignaggio, senza influenzare in modo marcato l'espressione del gene endogeno preso di mira; l'editing dell'introne CD11b utilizzando un transgene terapeutico che codifica IDUA (l'enzima mancante nei pazienti affetti da Mucopolisaccaridosi di Tipo 1) consente di limitare l'espressione di IDUA al lignaggio mieloide; Le HSPC modificate si innestano in modo efficiente nel midollo osseo di topi immunodeficienti e si differenziano in cellule mieloidi modificate che possono attraversare la BBB e popolare il cervello; La strategia di modifica dell'introne descritta in questo lavoro è versatile e potrebbe essere potenzialmente utilizzata per vettorizzare più proteine terapeutiche geneticamente codificate nel cervello e quindi affrontare molteplici disturbi metabolici e neurologici. Presentazione del poster: La circolarizzazione del modello di DNA a filamento singolo non virale per la correzione e l'inserimento genico migliora i risultati dell'editing nelle HSPC: La maggior parte degli approcci di inserimento genico utilizzati per modificare le HSPC ex vivo sono ostacolati dalla bassa efficienza della consegna del modello di DNA nel loro nucleo.

Cellectis ha sviluppato e ottimizzato un nuovo processo di editing genico, sfruttando la tecnologia TALEN® e la consegna di un modello di DNA circolare a filamento singolo, che consente un inserimento genico altamente efficiente nelle HSPC. I dati della ricerca hanno dimostrato che: La consegna di DNA a filamento singolo non virale associata alla tecnologia TALEN® consente l'inserimento di geni in cellule staminali ematopoietiche ripopolanti a lungo termine; la circolarizzazione del DNA a filamento singolo aumenta ulteriormente i tassi di inserimento di geni senza impattare la vitalità cellulare e la fitness delle HSPC, facilitando lo sviluppo di terapie cellulari ex vivo di prossima generazione.